Иммуноферментный анализ в настоящее время широко используется в качестве диагностического инструмента в различных отраслях промышленности, а также в медицине. Он также может использоваться в качестве аналитических инструментов для обнаружения определенных антигенов или антител в образце во время биомедицинских исследований.
Как работает иммуноферментный анализ?
ИФА исследование использует меченые ферментами антитела и антигены для обнаружения необходимых малых биологических молекул. Этот метод основан на основной концепции иммунологии, согласно которой антиген связывается со специфическим антителом. К таким молекулам антигена, которые могут быть идентифицированы в образце жидкости, относятся такие молекулы, как пептиды, гормоны и белки.
Ферменты, которые обычно используются в этом процессе, включают глюкозооксидазу и щелочную фосфазу. Антиген в жидкости связывается с конкретным антителом, которое затем обнаруживается с помощью другого антитела, связанного с ферментом. Происходит определенное изменение цвета или флуоресценция, которая указывает на присутствие антигена. Количество конкретной биологической молекулы, которая ищется и присутствует в образце, зависит от наблюдаемого цвета или флуоресценции.
Методы и процедуры ИФА
Существует несколько методов, которые используются для обнаружения очень низких концентраций биологических молекул, включая «непрямые» и «сэндвичные» методы. Кроме того, метод иммуноферментного анализа был усовершенствован до недорогого и портативного набора для ИФА, который может быть использован для большого количества населения в местах с ограниченными ресурсами.
В настоящее время, помимо множества преимуществ методики, существует и ряд ограничений. В растворе, который содержит изменение цвета, связанное с ферментом, сила цвета может меняться и не всегда точно отражает количество антител в исследуемой жидкости. Это может произойти, когда раствор был оставлен на длительный период времени, и может привести к ложноположительным результатам. Кроме того, существуют и другие особые обстоятельства, которые также могут привести к ложноположительным результатам, представляющим потенциальную проблему.